Antifungal susceptibility and detection of mutant ERG11 gene in vaginal Candida isolates in University of Uyo Teaching Hospital, Uyo, Nigeria

Ikenyi, C. L., *Ekuma, A. E., and Atting, I. A.

Department of Medical Microbiology and Parasitology, University of Uyo, Uyo, Nigeria

*Correspondence to: agantemekuma@uniuyo.edu.ng; +2348023075572

Abstract:
Background: Candida vulvovaginitis is an important cause of morbidity among women. Fluconazole and other azoles are among the commonest antifungal agents used for the treatment of this condition. Azole resistance among Candida species is an increasing problem, and mutations in the ERG11 gene is the commonest cause of fluconazole resistance in Candida. The objectives of this study are to determine antifungal susceptibility of vaginal Candida isolates and detect carriage of mutant ERG11 gene by them.

Methods: High vaginal swabs obtained from 260 participants were cultured on Saboraud’s Dextrose agar (SDA) for isolation of Candida, and identified by growth on CHROMagar Candida, germ tube and carbohydrate fermentation tests. Antifungal susceptibility to fluconazole, voriconazole, nystatin and flucytosine was determined by the Kirby Bauer disc diffusion method on supplemented Mueller Hinton agar. ERG11 gene was detected by conventional singleplex polymerase chain reaction (PCR) assay.

Results: Candida was isolated from 126 of 260 (48.5%) participants, and the identified species were Candida albicans, Candida glabrata, Candida tropicalis, Candida parapsilopsis and Candida famata. There were 112 (88.9%) isolates susceptible to fluconazole, 122 (96.8%) to voriconazole, 111 (88.1%) to nystatin, and 16 (6.6%) to flucytosine. The mutant ERG11 gene was detected in all four fluconazole-resistant isolates but not from any of five randomly selected fluconazole susceptible dose dependent (SDD) isolates.

Conclusion: Azole resistance among Candida in this environment is associated with mutant ERG11 gene expression.

Keywords: antifungi, fluconazole, Candida, ERG11, PCR

Received March 6, 2020; Revised April 22, 2020; Accepted April 24, 2020

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Sensibilité antifongique et détection du gène ERG11 mutant dans des isolats vaginaux de Candida à l’hôpital universitaire de Uyo, Uyo, Nigéria

Ikenyi, C. L., *Ekuma, A. E., et Atting, I. A.
Département de microbiologie médicale et de parasitologie, Université d’Uyo, Uyo, Nigéria *Correspondance à: agantemekuma@uniuyo.edu.ng; +2348023075572

Abstrait:
Contexte: La vulvovaginite à Candida est une cause importante de morbidité chez les femmes. Le fluconazole et d’autres azoles sont parmi les agents antifongiques les plus couramment utilisés pour le traitement de cette condition. La résistance à l’azole chez les espèces de Candida est un problème croissant, et les mutations du gène ERG11 sont la cause la plus fréquente de résistance au fluconazole chez Candida. Les objectifs de cette étude sont de déterminer la sensibilité antifongique des isolats vaginaux de Candida et de détecter le transport du gène ERG11 mutant par eux.

Méthodes: Des écouvillons vaginaux élevés obtenus auprès de 260 participants ont été cultivés sur gélose Dextrose de Saboraud (SDA) pour l’isolement de Candida, et identifiés par croissance sur CHROMagar Candida, tube germinatif et tests de fermentation des glucides. La sensibilité antifongique au fluconazole, au voriconazole, à la nystatine et à la flucytosine a été déterminée par la méthode de diffusion sur disque de Kirby Bauer sur de la gélose Mueller Hinton complétée. Le gène ERG11 a été détecté par un test classique de réaction en chaîne par polymérase (PCR).

Résultats: Candida a été isolé sur 126 des 260 participants (48,5%), et les espèces identifiées étaient Candida albicans, Candida glabrata, Candida tropicalis, Candida parapsilopsis et Candida famata. Il y avait 112 (88,9%) isolats sensibles au fluconazole, 122 (96,8%) au voriconazole, 111 (88,1%) à la nystatine et 16 (6,6%) à la flucytosine. Le gène ERG11 mutant a été détecté dans les quatre isolats résistants au fluconazole, mais pas dans aucun des cinq isolats dépendants de la dose (SDD) sensibles au fluconazole sélectionnés au hasard.

Conclusion: la résistance à l’azole chez Candida dans cet environnement est associée à l’expression du gène ERG11 mutant.

Mots-clés: antifongiques, fluconazole, Candida, ERG11, PCR

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Antifungal susceptibility and detection of mutant ERG11 gene in vaginal Candida isolates in University of Uyo Teaching Hospital, Uyo, Nigeria